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QIAGEN試劑盒miRNeasy Micro Kit (50) 分子生物試劑

  • 更新時間:  2023-07-27
  • 產(chǎn)品型號:  217084
  • 簡單描述
  • QIAGEN試劑盒miRNeasy Micro Kit (50)
    miRNeasy Micro Kit用于從少量培養(yǎng)細(xì)胞、分選細(xì)胞、冰凍切片激光捕獲顯微切割(LCM)樣本和動物及人體組織中純化RNA,包括miRNA和其他小RNA分子。
詳細(xì)介紹

QIAGEN試劑盒miRNeasy Micro Kit (50)


用于從少量細(xì)胞核組織中純化miRNA和總RNA
  • 從小樣本中有效純化miRNA和總RNA

  • 高純度RNA,適用于多種下游應(yīng)用

  • 簡單、靈敏的操作流程

  • 自動化實驗方案

miRNeasy Micro Kit用于從少量培養(yǎng)細(xì)胞、分選細(xì)胞、冰凍切片激光捕獲顯微切割(LCM)樣本和動物及人體組織中純化RNA,包括miRNA和其他小RNA分子。

從較少量的細(xì)胞中可靠回收miRNA。

使用miRNeasy Micro Kit從10倍梯度稀釋的Jurkat細(xì)胞(106至10個細(xì)胞)中純化總RNA。[A] 采用手動方法或 [B] 使用QIAcube全自動核酸純化儀,從各洗脫液中純化RNA,重復(fù)兩次。在Rotor-Gene Q實時熒光定量PCR分析儀上,使用miScript PCR System及純化的RNA檢測miR-16。在低至10個細(xì)胞中亦可檢測出miR-16,并獲得一致且可重復(fù)的CT值。陰性對照中未檢測到信號(藍(lán)色和黃色曲線)。


QIAGEN試劑盒miRNeasy Micro Kit (50)


miRNeasy實驗流程。




性能
miRNeasy Micro Kit可有效純化來自少量組織和細(xì)胞樣本的RNA??杉兓喾N組織和細(xì)胞的RNA,包括難裂解組織。

miRNeasy Kits制備的RNA純度高,可直接用于敏感的下游應(yīng)用。miRNeasy操作流程將鹽或ben fen污染的可能性降到zui低,這些污染可能影響后續(xù)分析。與其他miRNA純化(如使用ben fen抽提和沉淀)相比,miRNeasy Micro Kit除了純度更高以外,還能獲得更高產(chǎn)量。
原理

miRNeasy Micro Kit可從少量培養(yǎng)細(xì)胞(至多1 x 106個細(xì)胞)和多種動物及人體組織(至多5 mg組織)中純化總RNA,包括miRNA和其他小RNA分子。試劑盒整合了基于ben fen/胍的樣本裂解方法和基于硅膠膜的總RNA純化方法。

試劑盒中包括的QIAzol Lysis Reagent是ben fen和異硫氰酸胍的單相溶液,便于裂解組織,抑制RNases,并去除大部分有機(jī)抽提裂解液中的胞內(nèi)DNA和蛋白。樣本在QIAzol Lysis Reagent中勻漿后,加入氯仿并離心,RNA位于上層水相。抽提水相,在RNeasy MinElute離心柱上純化RNA,污染物被洗去。du特設(shè)計的RNeasy MinElute離心柱可用少至10 µl洗脫體積濃縮RNA。

操作流程

miRNeasy Micro Kit純化的總RNA包括18個核苷酸以上的RNA。富含miRNA的組分和總RNA(>200 nt)組分可分開純化。包括miRNA的總RNA非常適合通過real-time RT-PCR的miRNA定量分析。單獨(dú)富含小RNA的組分更適用于某些mRNA和rRNA會導(dǎo)致更高背景的應(yīng)用。

在QIAcube全自動核酸純化儀上自動純化miRNA

在QIAcube全自動核酸純化儀上可wan全自動純化包括miRNA的總RNA。新型QIAcube全自動核酸純化儀采用技術(shù)處理QIAGEN離心柱,將自動化、低通量樣品制備無縫整合到實驗室工作流程中。使用QIAcube全自動核酸純化儀的樣品制備流程與手工操作相同(如裂解、結(jié)合、洗滌和洗脫),可使用miRNeasy Micro Kit進(jìn)一步純化高品質(zhì)RNA。

應(yīng)用

miRNeasy Micro Kit可純化包括miRNA的總RNA,用于多種應(yīng)用,包括:

  • Northern印跡分析

  • 定量real-time RT-PCR(如使用miScript PCR System)

  • 芯片分析

  • 目錄號:217084

  • 品牌:Qiagen

  • 規(guī)格:50Reactions

  • 目錄價:¥4710.00

  • 市場價格:¥4003.50

  • 會員價格:¥4003.50

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